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荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用

日期: 2025-06-04
浏览次数: 2144
案例名称: 荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用

荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用

天津港东科技股份有限公司-应用分析部

摘要: 维生素B2又名核黄素,在食品中以游离形式或磷酸酯等结合形式存在。膳食中的主要来源是各种动物性食品,其次是植物性食品的豆类和新鲜绿叶蔬菜。检测其含量也有着许多的方法,其中荧光分光光度法是对荧光物质进行定性和定量的有效方法,它是维生素B2含量测定的一个比较常用的方法。

本文以测定多维片中维生素B2(核黄素)元素含量为例,依据GB/T 5009.85-2003《食品中核黄素(维生素B2)的测定》,应用港东F-380型荧光分光光度计对多维片中维生素B2含量进行测定。结果证明此方法操作简便,线性良好是测定多维片中维生素B2含量的理想方法。



关键词:荧光分光光度法  维生素B2核黄素  多维片


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· 原理

核黄素在 440nm~500nm 波长光照射下发生黄绿色荧光。在稀溶液中其荧光强度与核黄素的浓度成正比。在波长 525nm 下测定其荧光强度。试液再加入低亚硫酸钠(Na 2 S 2 O 4 ),将核黄素还原为无荧光的物质,然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度,两者之差即为多维片中核黄素所产生的荧光强度。

   

· 实验条件

1、仪器及附件:

天津港东 F-380 型荧光分光光度计

荧光石英比色皿

 

2、分析条件: 

    激发波长:440nm

    发射波长:525nm

 

3、药品:

    硅镁吸附剂(60~100 目)、乙酸钠、木瓜蛋白酶、淀粉酶、盐酸、氢氧化钠、低亚

    硫酸钠(Na 2 S 2 O 4 )、洗脱液(丙酮、冰乙酸、水)、高锰酸钾、过氧化氢、核黄素标准溶液(纯度 98%)等。

 

4、其他:

电热恒温培养箱、高压消毒锅、分析天平(0.0001g)、容量瓶、盐基交换柱、三角瓶、瓷坩埚、移液管、刻度试管、具塞比色管、试管架、擦镜纸、滴管、量筒、磁力搅拌器、pH 计等。


 

· 样品及标准样品处理

    特别注意:整个操作过程需避光进行

1、样品溶液的制备

(1)样品提取

    ① 水解

荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用


     ② 酶解

荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用

    ③ 过滤

荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用


(2)氧化去杂质

荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用

(3)核黄素的吸附和洗脱

荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用

2、标准溶液的制备

(1)核黄素标准储备液(25μg/mL):

    将标准品核黄素粉状结晶置于真