荧光分光光度法在多维片中维生素B2含量测定上的应用
天津港东科技股份有限公司-应用分析部
摘要： 维生素B2又名核黄素，在食品中以游离形式或磷酸酯等结合形式存在。膳食中的主要来源是各种动物性食品，其次是植物性食品的豆类和新鲜绿叶蔬菜。检测其含量也有着许多的方法，其中荧光分光光度法是对荧光物质进行定性和定量的有效方法，它是维生素B2含量测定的一个比较常用的方法。
本文以测定多维片中维生素B2（核黄素）元素含量为例，依据GB/T 5009.85-2003《食品中核黄素（维生素B2）的测定》，应用港东F-380型荧光分光光度计对多维片中维生素B2含量进行测定。结果证明此方法操作简便，线性良好是测定多维片中维生素B2含量的理想方法。
关键词：荧光分光光度法 维生素B2核黄素 多维片
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· 原理
核黄素在 440nm～500nm 波长光照射下发生黄绿色荧光。在稀溶液中其荧光强度与核黄素的浓度成正比。在波长 525nm 下测定其荧光强度。试液再加入低亚硫酸钠（Na 2 S 2 O 4 ），将核黄素还原为无荧光的物质，然后再测定试液中残余荧光杂质的荧光强度，两者之差即为多维片中核黄素所产生的荧光强度。
· 实验条件
1、仪器及附件：
天津港东 F-380 型荧光分光光度计
荧光石英比色皿
2、分析条件：
激发波长：440nm
发射波长：525nm
3、药品：
硅镁吸附剂（60～100 目）、乙酸钠、木瓜蛋白酶、淀粉酶、盐酸、氢氧化钠、低亚
硫酸钠（Na 2 S 2 O 4 ）、洗脱液（丙酮、冰乙酸、水）、高锰酸钾、过氧化氢、核黄素标准溶液（纯度 98%）等。
4、其他：
电热恒温培养箱、高压消毒锅、分析天平（0.0001g）、容量瓶、盐基交换柱、三角瓶、瓷坩埚、移液管、刻度试管、具塞比色管、试管架、擦镜纸、滴管、量筒、磁力搅拌器、pH 计等。
· 样品及标准样品处理
特别注意：整个操作过程需避光进行
1、样品溶液的制备
（1）样品提取
① 水解
② 酶解
③ 过滤
（2）氧化去杂质
（3）核黄素的吸附和洗脱
2、标准溶液的制备
（1）核黄素标准储备液（25μg/mL）：
将标准品核黄素粉状结晶置于真