荧光分光光度计其实是一种比较常见的实验用仪器。它主要是用于经光源激发后所产生或是经由化学处理后所产生的荧光物质成份分析,多被用于环境污染、食品安全等一些较要重要的社会性课题上。其还可分为滤光片-单色器荧光计及滤光片荧光计等的分类。下面就来介绍一下它是怎样工作的。
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一、激发光源
光源的强度可能对测定的灵敏程度造成直接的影响。测量中比较常用的光源如氙灯和汞灯,氙灯可能产生一些强烈的连续性的辐射;而高压汞灯则会发射出波长范围更广的光谱线。目前是用激光作为光源,因其光源单色性好且光强度也大;脉冲激光的光照时间更短,这样就可有效避免一些感光物质的分解,从而达到更好的分光效果。注意,在激发光源时主要应考虑的就是光源的强度和稳定性。
二、单色器
一般的荧光分析仪一般都有两个单色器,一个单色器用于除去一些不需要的光源,使得需要的光激发光更好地透过从而照射到样品;另一个单色器则主要负责将激发光所产生的反射光、瑞利散射光及拉曼散射光等进行过滤。其结构较为简单,但无法提供荧光光谱或是激发光谱。而分光光度计却是采用光栅分光,通过这种方式可以得到单色性好的激发光,并将其中某一波长的荧光分出,从而减少读谱干扰,从而得到激发光谱或荧光光谱。
三、样品池
用于荧光分析的样品池,应采用低荧光材料制作,如石英。形状长方或正方形及圆形,用得比较多的是正方形,主要是因为其所产生的散射干扰更少。
四、检测器
荧光分光光度计中的检测器需要比较高的灵敏度,此时需要用光电倍增管来制作。为使其中激发的荧光得到过滤从而减少测量干扰,还需将仪器中的检测光路与激发光路保持垂直。