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荧光分光光度法在硒元素含量测定上的应用

日期: 2022-06-08
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荧光分光光度法在硒元素含量测定上的应用

天津港东科技股份有限公司,应用分析部


摘要: 硒元素广泛的存在于海洋生物体、水质、食品以及饲料中,检测其含量也有着许多的方法。其中荧光分光光度法是对荧光物质进行定性和定量的有效方法,它是硒元素含量测定的一个比较常用的方法。

本文以测定海洋生物体中硒元素含量为例,依据GB 17378.6-2007《海洋监测规范:第6部分生物体分析》12.1 硒 荧光分光光度法(仲裁法),应用港东F-380型荧光分光光度计对硒元素含量进行测定。结果证明此方法操作简便, 线性良好是测定硒元素含量的理想方法。


关键词: 荧光分光光度法 硒 海洋生物体 水 食品 饲料


 原理

生物样品经硫酸—高氯酸—钼酸钠消解,在酸性介质 中,四价硒与2,3-二氨基萘(DAN)反应生成有绿色荧光的 4,5-苯并苤硒脑,用环己烷萃取,在激发波长376nm, 发射波长520nm下,进行荧分光光度测定。


 实验条件

仪器及附件:

天津港东 F-380 型荧光分光光度计

荧光石英比色皿


分析条件:

激发波长:376nm

发射波长:520nm


药品:

硝酸(优级纯)、高氯酸(优级纯)、盐酸(优级纯)、氨水 (优级纯)、甲基红溶液、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)、盐酸羟胺、2, 3-二氨基萘、硒标准溶液等。


其它:

精密pH试纸、电热板、分析天平(0.0001g) 、粉碎机、烘箱、水浴锅、具塞比色管、分液漏斗、擦镜纸、容量瓶、三角瓶、移液管等。


 样品及标准样品处理


1、样品前处理

将样品进行烘干, 并用玛瑙研钵磨碎, 全部过80目~100目(180μm ~ 154μm)尼龙筛。


2、样品消化

(1)样品制备液流程图

荧光分光光度法在硒元素含量测定上的应用

(2)样品空白制备液

按照上面样品制备流程图的步骤制备样品空白制备液,即不加入待测样品,直接进入“加水润湿”步骤。


(3)样品及样品空白待测液

荧光分光光度法在硒元素含量测定上的应用


3、标准曲线待测液

取6个250mL锥形瓶, 分别加入0.00mL,1.00mL,2.00mL,3.00mL,4.00mL,5.00mL硒标准使用液(0.1μg/mL) ,加水约10mL, 混匀。按照样品消化流程对标准品进行消化处理,然后进行待测液的制备,配制成硒标准曲线溶液待测液。


  测定结果

应用港东F-380型荧光分光光度计的“光度测定”模块建立硒标准工作曲线,并进行样品测定。


  结论

采用荧光分光光度法测定硒元素含量,操作简单,方法准确,是一种理想的方法。

由于硒元素待测液遇光不稳定, 而且在测定过程中需要进行样品的背景扣除, 因此实验对仪器的功能要求更高。港东 F-380型荧光分光光度计率先在硬件上采用了激发侧挡光快门的设置, 从而避免了样品被强光的直接照射; 软件上采用了独特 的双背景扣除功能,自动计算硒元素的浓度,使整个实验操作简便,结果重现性良好。




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© Tianjin Gangdong Sci&Tech.Development Co., 2011

Printed in CHINA, September 1, 2011


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